对于载体的单酶切和双酶切 胶图分别会如何 为什么会这样啊 谢谢帮忙回答

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单酶切一个电泳道上会有几个比较亮的带,而且你所根据基因大小所选择的条带内也不一定是你要的。

原因是单酶切形成的粘性末端完全相同,就像拼图,除了内容不同,两边完全切合。所以结合方式过多,可能性也多,如质粒和目的基因正确连接,质粒和目的基因反转连接,质粒和质粒连接,目的基因与目的基因的连接。双酶切一般会有3条带,而且正确现象应只有一个是非常亮的。因为两种酶识别两个位点切开,无论是质粒还是目的片段两端的粘性末端完全不同,还是拼图,内容不同,两端切合口也不同,除了一种连接方式外没有其他连接了。胶途中3条带分别为:目的片段条带,空质粒条带,最亮的重组质粒条带。

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